Фенилгалактозид CAS: 2818-58-8

Влияние на активность фермента: Фенилгалактозид обычно используется для измерения активности фермента β-галактозидазы.Когда фенилгалактозид гидролизуется β-галактозидазой, он высвобождает п-нитрофенол.Накопление п-нитрофенола можно измерить количественно, что дает представление об активности β-галактозидазы.Этот эффект используется в таких приложениях, как ферментные анализы и системы скрининга.

Анализ экспрессии генов: Фенилгалактозид часто используется в качестве субстрата в экспериментах по молекулярной биологии для изучения экспрессии генов.Ген lacZ, кодирующий β-галактозидазу, обычно слит с регуляторными последовательностями других представляющих интерес генов.Экспрессия гена lacZ и гидролиз фенилгалактозида β-галактозидазой могут указывать на характер экспрессии и уровень изучаемого гена-мишени.

Системы скрининга. Фенилгалактозид является важным компонентом систем скрининга, в которых используется активность β-галактозидазы.Одним из широко известных примеров является метод сине-белого скрининга, который используется для идентификации рекомбинантных или трансформированных клеток в экспериментах по молекулярной биологии.Колонии, которые успешно восприняли рекомбинантную ДНК или подверглись генетической рекомбинации, будут экспрессировать β-галактозидазу, что приводит к гидролизу фенилгалактозида и образованию синего цвета.

Очистка белков. В некоторых случаях фенилгалактозид можно использовать в качестве лиганда для аффинной хроматографии для очистки белков, которые специфически связываются с β-галактозидазой или активируются ею.Представляющий интерес белок может иметь аффинную метку или слитую метку, содержащую домен, связывающий β-галактозидазу.Пропуская смесь белков через колонку с иммобилизованным фенилгалактозидом, желаемый белок можно избирательно удерживать и впоследствии элюировать.