4-Нитрофенил бета-D-галактопиранозид CAS: 200422-18-0

Эффект: ONPG представляет собой субстрат, специально используемый для обнаружения присутствия и активности фермента β-галактозидазы.Когда фермент β-галактозидаза присутствует и активен, он расщепляет ONPG на два продукта: о-нитрофенол и производное галактозы.Высвобождение о-нитрофенола приводит к изменению желтого цвета, которое можно измерить с помощью спектрофотометра.

Применение: ONPG имеет несколько применений в исследованиях в области молекулярной биологии и биохимии:

Определение активности β-галактозидазы: ONPG обычно используется для измерения и количественной оценки активности фермента β-галактозидазы.Скорость образования о-нитрофенола, прямо пропорциональная активности фермента, может быть измерена спектрофотометрически.

Экспрессия и регуляция генов: ONPG часто используется в экспериментах, связанных с исследованиями экспрессии и регуляции генов.Его часто используют в анализах слитых белков, таких как широко используемая слитая система lacZ, для изучения экспрессии генов под контролем специфических промоторов.Активность бета-галактозидазы, измеренная с помощью ONPG, дает представление об уровне экспрессии генов.

Скрининг активности β-галактозидазы: ONPG можно использовать в качестве метода колориметрического скрининга в технологии рекомбинантной ДНК для выявления присутствия и функциональности гена LacZ, который кодирует β-галактозидазу.Этот метод скрининга помогает идентифицировать клоны, содержащие интересующий ген.

Исследования кинетики ферментов: ONPG также полезен при изучении кинетики фермента β-галактозидазы.Измеряя скорость реакции фермент-субстрат при различных концентрациях субстрата, можно определить кинетические параметры, такие как константы Михаэлиса-Ментена (Km) и максимальные скорости реакции (Vmax).